L'expérience des levures mutées
Hypothèse : L'eau protège des Uvs
Matériel :
> Solution de levure ade2
> Milieu nutritif ypd
> Hotte à Uvs (C)
> 2 cristallisoirs stérilisés grâce à la hotte à Uvs (un est plus fin que l'autre)
> Brûleur électrique
> Pipettes/râteaux à ensemencer stérilisés
> Eau de javel
> Lame de Kova
> Boites de pétri
> Microscope
> Poche d'eau
Protocole :
On allume la hotte à Uvs pour préparer un environnement stérile.
On a coulé un milieu nutritif dans les boites de pétri.
En attendant que les boites soient prêtes, on a compté le nombre moyen de levures dans la solution pour éviter qu'il y en ait trop. Pour cela, on a utilisé les lames de Kova et le microscope, cela permet de calculer le nombre de levures par petit carré (9 carrés par cupules) On a pris une moyenne de 8 levures par petit carré.
(source document sur les lames de Kova du professeur)
On a déposé avec la pipette une goutte de solution par boite.
Ensuite, on l'a étalée dans les boites avec le râteau en prenant soin de rester proche du brûleur électrique pour que l'environnement soit stérile pour limiter le risque de moisissures.
EXPERIENCE 1 (26/11/14)
Pour cette expérience on a utilisé 3 boites de pétri.
On a posé un cristallisoir vide sur la première, c'est l'expérience témoin.
Sur la seconde on a posé un cristallisoir remplit d'1 cm d'eau et sur la troisième un de 2,5 cm d'eau.
On les a mises chacune 60s sous la hotte à Uvs en prenant soin de l'éteindre lorsque l'on manipule les boites à l'intérieur.
Résultats attendus : Si l'eau protège des Uvs, on devrait observer des levures en moins grande quantité et certaines mutées (donc blanches) dans l'expérience témoin qui n'a pas d'eau.
Dans la seconde boite, il devrait y avoir moins de levures mutées et plus de levures que dans la première et dans la troisième boite, il y aurait encore moins de levures mutées et un nombre encore plus important de levures non mutées.
Résultats observés :
Au bout d'une semaine, on a observé que dans toutes les boites, il n'y a que des levures non mutées.
Boite 1 (témoin cristallisoir vide) :
Boite 2 (1 cm d'eau dans le cristallisoir) :
On ne remarque pas de différences notables entre les 3 expériences, il semble y avoir autant de levures non mutées dans les 3 boites.
Interprétation : Les levures ne sont pas mutées donc les Uvs ne sont pas parvenus jusqu'à elles (même dans l'expérience témoin) ce qui nous laisse supposer que le cristallisoir en verre n'a pas laissé passer les Uvs.
Notre expérience n'est donc pas validée.
EXPERIENCE 2 (10/12/14)
Après notre première expérience non concluante, on a réessayé avec un protocole légèrement différent.
On a utilisé 7 boites de pétri. A la place du premier cristallisoir on en a utilisé un plus fin et on s'est aussi servis du couvercle des boites de pétri et d'une poche d'eau. On a essayé différents moyens pour placer de l'eau entre les Uvs et les levures. On les a mises sous la hotte à Uvs durant 90s.
Boite n1 : couvercle retiré avec rien entre les Uvs et les levures (expérience témoin)
Boite n2 : cristallisoir plus fin vide
Boite n3 : cristallisoir à moitié rempli d'eau
Boite n4 : cristallisoir rempli en entier d'eau
Boite n5 : couvercle de la boite retourné et vide
Boite n6 : couvercle de la boite retourné et plein d'eau
Boite n7 : utilisation d'une poche d'eau
Résultats attendus :
On devrait observer dans la première boite une proportion de levures mutées importante.
Comme dans la première expérience on devrait observer le nombre de levures mutées quand la quantité d'eau augmente.
Avec l'expérience des couvercles c'est la même démarche : des levures mutées dans la boite n5 et moins dans la boite n6.
Avec l'expérience de la poche on devrait observer un nombre faible de levures mutées.
Résultats observés :
Boite n1 (témoin sans couvercle) :
Boite 3 (2,5 cm d'eau dans le cristallisoir) :
On observe très peu de levures blanches (peu visibles sur la photo) et une quantité de levures globales très faibles.
Boite n2 (cristallisoir vide) :
Boite n3 (cristallisoir à moitié rempli) :
Boite n4 (cristallisoir rempli):
Avec le cristallisoir, on ne voit que des levures non mutées, il ne semble pas y avoir de différences en terme de quantité de levures.
Boite n5 (couvercle retourné et vide) :
Boite n6 (couvercle retourné et plein d'eau) :
On ne voit aucune différence entre les deux, il n'y a pas de présence de levures mutées.
Boite n7 (poche d'eau) :
On obtient des résultats différents de l'expérience témoin, il n'y a toujours pas de levures mutées.
Interprétation : les résultats n'étant pas ceux attendus on ne peut pas en conclure que l'eau a un effet protecteur vis à vis des Uvs. A chaque expérience, on peut supposer que c'est le récipient qui empêche les Uvs d'atteindre les levures. On peut seulement en conclure que les Uvs C ont un effet mutagène et qu'ils sont très peu pénétrants.
L'expérience n'est pas validée.